本文將通過分析單克隆抗體、病毒衣殼蛋白,對比Maurice™系統Turbo CE-SDS與傳統SDS-PAGE兩種方法的數據質量、靈敏度及重現性,展示Turbo CE-SDS如何實現蛋白分析的“智能升級”!
效率革新:Turbo CE-SDS
讓蛋白分析實現高效自動化
傳統SDS-PAGE需手動制膠、染色、脫色,耗時長達數小時,且產生大量有害廢液(圖1)。
Maurice™ Turbo CE-SDS通過全自動工作流程,僅需65分鐘即可完成12個樣本分析,且廢液量大大減少,大幅提升實驗室效率與環保性。

高靈敏度與精準定:CE-SDS
精準解析蛋白雜質與修飾
Maurice™ Turbo CE-SDS的分辨率遠超凝膠電泳,能夠檢測到SDS-PAGE無法分辨的微弱峰和次要修飾,提供更高的分離和定量精度。
以單抗藥物Belimumab為例,圖 2A和2B分別展示了Belimumab使用Maurice™ Turbo CE-SDS方法在非還原和還原條件下生成的電泳圖譜,所顯示的峰對應于凝膠電泳結果中的各種條帶。在非還原條件下,CE-SDS不僅清晰顯示主峰,還檢測到3個次要峰Peak1-Peak3(圖2A),而SDS-PAGE凝膠檢測不到(圖2C)。在還原條件下CE-SDS生成的電泳圖顯示出分辨良好的輕鏈(LC)和重鏈(HC),以及其他小峰。這些微量雜質可能影響藥物穩定性與療效,CE-SDS為生物類似藥開發提供了關鍵的質控依據。
圖2 非還原與還原條件下單抗Belimumab的CE-SDS和SDS-PAGE分析結果
Maurice的CE-SDS還可用于AAV病毒衣殼蛋白的定量分析。如圖3所示,CE-SDS能夠清晰區分AAV8與AAV9的VP1/VP2/VP3組成,并檢測到低分子量(LMW)雜質與修飾產物(如VP3a),為基因治療產品的質量控制提供全面支持。
零學習成本:Compass 軟件
讓數據解讀無縫銜接
Compass for iCE軟件的Lane View功能可以將實驗得到的電泳圖譜以類似傳統凝膠圖的形式展示出來,無縫銜接傳統數據解讀習慣,使得數據分析更加直觀易懂,且與傳統電泳結果直接對標。
圖4 AAV樣品的Compass for iC產生的凝膠圖(左)與SDS-PAGE凝膠(右)
優越的重現性:CE-SDS
突破傳統電泳的批次變異瓶頸
Turbo CE-SDS通過定量峰積分取代定性條帶強度評估,顯著降低了實驗間的變異性。通過對比Belimumab在Maurice™ Turbo CE-SDS連續34次進樣與SDS-PAGE 12條泳道的數據,發現非還原條件下,CE-SDS的總峰面積相對標準偏差(%RSD)僅為1.04%,而SDS-PAGE高達23.56%(圖5)。還原條件下,Turbo CE-SDS的LC和HC的峰面積百分比的%RSD也遠低于SDS-PAG(圖6),表明CE-SDS具有更高的定量重現性。同樣在AAV8與AAV9的樣本分析中也證明了這一點。
圖5 Belimumab的Maurice Turbo CE-SDS和SDS-PAGE總峰面積重現性的比較(非還原條件下)
圖6單抗 Belimumab的Maurice Turbo CE-SDS和SDS-PAGE的峰面積百分比重現性的比較(還原條件下)
將Maurice™ Turbo CE-SDS 與 SDS-PAGE 同步用于單克隆抗體和 AAV 樣本分析,數據已經證實 CE-SDS 以更快速度、更高精度和更強重現性實現蛋白分析新突破!
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